半定量RT-PCR检测猪延髓中色氨酸羟化酶2基因表达方法的建立

作者:马红娜; 邓衔柏; 马勇江; 何敏; 习欠云; 宁章勇; 张桂红; 卢培成; 张曼玉
来源:动物医学进展, 2010, (07): 1-6.
DOI:10.16437/j.cnki.1007-5038.2010.07.001

摘要

利用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,测定仔猪延髓组织中色氨酸羟化酶2(TPH-2)基因mRNA表达水平,以β-actin为内标,分析相对表达量及其与驱赶应激的关系。通过探讨和优化PCR体系中退火温度、Mg2 浓度和循环次数等参数,建立了检测延髓组织中色氨酸羟化酶-2基因mRNA表达的半定量RT-PCR体系。通过分析色氨酸羟化酶-2 PCR产物与β-actin PCR产物电泳后的灰度比值,可知驱赶应激对TPH-2基因mRNA表达量的影响。

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