稳定同位素稀释超高效液相-串联质谱联用法同时测定人血清中13种氨基酸的含量

作者：时正媛; 王淑梅; 鄢丹

来源：中国临床药理学杂志, 2018, 34(09): 1108-1118.

DOI：10.13699/j.cnki.1001-6821.2018.09.028

• 串联质谱法
• 稳定同位素标记
• 氨基酸
• 人血清

目的建立同时测定人血清中13种氨基酸的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法。方法以稳定同位素标记的氨基酸作为内标,血清样本经沉淀蛋白后,取上清液进行UPLC-MS/MS分析,色谱柱为Acquity BEH amide色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相为乙腈-水-20 m mol·L-1甲酸铵-0.15%甲酸溶液,用甲酸调p H至3.0,梯度洗脱。结果基质效应不影响测定结果,保留时间(tR)均在11 min内,精氨酸、谷氨酸、脯氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸和苏氨酸的线性范围为1.0200.0μmol·L-1,酪氨酸、丝氨酸的线性范围为5.0200.0μmol·L-1,丙氨酸、甘氨酸的线性范围为10.0200.0μmol·L-1,各氨基酸在标准曲线范围内线性关系良好(r>0.9971),加标回收率均≥89.6%,批内精密度(RSD)均≤3.2%,批间精密度(RSD)均≤4.1%,在测定过程中稳定性符合要求。结论该方法操作简便、专属性强,可同时测定人血清中13种内源性氨基酸的含量。

• 单位
  首都医科大学附属北京世纪坛医院