基于网络药理学及细胞实验验证软肝饮治疗肝癌的可能

作者：高飞; 张国梁^*

来源：辽宁中医杂志, 2023, 50(06): 8-255.

DOI：10.13192/j.issn.1000-1719.2023.06.002

• 软肝饮
• 网络药理学
• 肝癌
• 凋亡
• 增殖

目的 基于网络药理学及细胞实验研究软肝饮治疗肝细胞癌(HCC)的作用机制。方法 基于中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、BATMAN数据库及Drugbank数据库筛选出软肝饮有效成分及靶点基因。通过GeneCards、OMIM数据库及Liverome、OncoDB.HCC数据库筛选出HCC的疾病靶点基因，运用Cytoscape构建化合物-基因靶点网络；并将有效成分靶目与疾病靶点上传到STRING数据库，构建蛋白互作网络图(PPI),使用R语言进行核心基因的筛选并对关键靶点进行GO富集分析和KEGG富集分析。基于网络分析结果，使用体外细胞实验方法对药物治疗关键靶点作用进行验证。结果 (1)预测得到软肝饮治疗肝癌的有效成分59个及共作靶点1301个。有效成分中度值较高的为新隐丹参酮Ⅱ、脱氧新胰蛋白酶酮、次甲丹参醌、反式刚酸、槲皮素、茯苓甾醇、β谷甾醇等；共作靶点及PPI网络图核心基因为AKT1、TP53、PIK3CA、EGFR、JUN等；GO分析有血管收缩舒张调节、分泌颗粒腔、磷脂酶C活性等；KEGG通路分析有氨基酸代谢、神经活性配体-受体相互作用、MAPK信号通路、癌症关连通路等显著通路。(2)细胞实验表明，软肝饮含药血清处理肝癌Hu-7、HepG2细胞后，细胞增殖、迁移能力显著降低；Western Blot检测肝癌细胞经软肝饮含药血清处理后，细胞中Cleaved Caspase-3、Cleaved PARP凋亡相关蛋白表达相较肝癌细胞组和正常血清对照组升高；p-c-Raf、p-c-MEK、p-c-Myc、p-c-Fos蛋白表达相较肝癌细胞组和正常血清对照组下降。结论 (1)生信学提示软肝饮和肝癌具有丰富的关联靶点，并通过多通路调控肝癌细胞的发生过程；(2)软肝饮可能借升高Cleaved Caspase-3、Cleaved PARP凋亡蛋白表达，下调p-c-Raf、p-c-MEK、p-c-Myc、p-c-Fos肿瘤相关基因表达，从而促使肝癌Hu-7、HepG2细胞株凋亡，抑遏肝癌Hu-7、HepG2细胞株的增殖迁移侵袭能力，进而起到治疗肝癌的作用。

• 单位
  安徽中医药大学; 安徽中医药大学第一附属医院