基于转录组学研究维生素C对猪睾丸细胞增殖活力的影响

作者:曹嘉程; 王静; 宋红兵; 吴艳玲; 肖天放; 林瑞意*
来源:福建农林大学学报(自然科学版), 2023, 52(05): 676-686.
DOI:10.13323/j.cnki.j.fafu(nat.sci.).2023.05.013

摘要

使用维生素C(VC)处理猪睾丸(ST)细胞,探究其促进ST细胞增殖活力的作用机制,为促进雄性动物生殖系统发育提供依据。通过检测不同浓度VC在不同处理时间下对ST细胞增殖活力的影响以确定VC的最佳作用条件,并检测VC最佳作用条件下对ST细胞增殖活力、细胞内活性氧(ROS)含量、细胞凋亡、细胞周期的影响;根据RNA-seq测序数据筛选VC试验组(采用250μmol·L-1 VC处理ST细胞72 h)与对照组(采用完全培养基处理ST细胞72 h)ST细胞的差异表达基因,并进行基因本体(GO)功能注释及京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。结果表明:(1)用250μmol·L-1 VC处理72 h极显著提高了ST细胞增殖活力(P<0.01),且效果最佳;(2)与对照组相比,VC试验组极显著降低了ST细胞内ROS含量、细胞凋亡比例及G0/G1期的细胞比例(P<0.01),同时极显著提高了S期的细胞比例(P<0.01);(3)根据RNA-seq测序数据共筛选出1 668个差异表达基因,包括1 052个上调基因、616个下调基因;(4)GO功能注释和KEGG富集分析显示,差异表达基因多富集在细胞周期、细胞活力、细胞发育、催化活性等生物学过程中,其中,与细胞增殖相关的显著性富集通路包括黏附斑激酶信号通路、FoXO信号通路、磷酸肌醇代谢信号通路等。综上,VC可能通过调控ST细胞周期、凋亡、自噬、代谢的相关基因和信号通路,继而提高ST细胞的增殖活力。

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