摘要
稻瘟病新抗性基因Pi39来源于粳稻品种Q15,定位于水稻第12号染色体,前期研究发现候选基因区域预测有12个抗病相关候选基因,其中候选基因Pi39E最大,克隆的难度较大。为了构建Pi39E长片段载体,本实验通过加大反应底物的浓度,目的片段的质量浓度为124 ng/μL,质粒载体的质量浓度为158 ng/μL,目的片断与质粒DNA按1.15∶1的摩尔浓度比进行连接反应,在9μL的总体系中加入1μL的PEG4000,同时采用电击大肠杆菌DH5α转化方法优化实验方案,成功构建该载体。本结果对新抗性基因Pi39精细定位及其功能的研究具有重要意义。
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单位中南民族大学; 生命科学学院