siRNA沉默CD99基因表达对髓母细胞瘤DAOY细胞增殖和凋亡的影响

作者：张鹏; 梁励玮; 陈昕薇; 任勇^*

来源：中国临床神经外科杂志, 2019, 24(10): 615-618.

DOI：10.13798/j.issn.1009-153X.2019.10.012

• 髓母细胞瘤
• 细胞增殖
• 细胞凋亡
• CD99
• 小干扰RNA
• 基因沉默

目的探讨siRNA沉默CD99基因表达对髓母细胞瘤细胞系DAOY细胞增殖和凋亡的影响。方法利用CD99 siRNA转染髓母细胞瘤DAOY细胞,细胞分为沉默1组(转染CD99 siRNA-1#)、沉默2组(转染CD99 siRNA-2#)、对照组(转染siRNA阴性对照),采用实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测沉默效果。利用CCK-8细胞增殖实验、平板克隆形成实验检测细胞增殖能力,采用流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡。结果沉默1组和沉默2组CD99蛋白和mRNA表达水平均明显低于对照组(P<0.05),而沉默2组又明显低于沉默1组(P<0.01);因此,选用CD99 siRNA-2#进行后续实验。沉默CD99基因表达后3、4、5 d,沉默2组细胞增殖水平较对照组明显降低(P<0.05);平板克隆形成实验结果显示,沉默2组细胞克隆集落数明显减少(P<0.05)。沉默2组G0/G1期细胞百分比较对照组明显增加(P<0.05),S期细胞、G2/M期细胞百分比明显低于对照组(P<0.05)。沉默2组细胞早期凋亡率(8.75%±1.47%)显著高于对照组(3.42%±1.21%;P<0.05)。结论 CD99基因在髓母细胞瘤DAOY细胞的增殖和凋亡中发挥重要作用,推测CD99基因可能成为治疗髓母细胞瘤的一个新靶点。