摘要
目的探讨Toll样受体(TLR)1~9在人眼角膜上皮和上皮细胞系的表达及其功能性。方法以健康人外周血单个核细胞(PBMC)为阳性对照,收集20例健康青年人角膜上皮标本和培养永生化人角膜上皮细胞系(THCE)细胞,用半定量反转录聚合酶链反应检测TLR1~9mRNA表达;Western印迹检测TLR2、4的蛋白质表达;TLR3和TLR4的配体对THCE刺激后酶联免疫检测分泌IL8的变化,结合抗体封闭实验,研究角膜上皮TLR的功能性。结果与PBMC比较,人角膜上皮强表达TLR1、2、3、5、6、9,弱表达TLR8,微弱表达TLR4;20例角膜上皮标本中发现1例TLR3、4、6、8阴性表达,1例TLR5微弱表达;人角膜上皮在蛋白质水平表达TLR2、4;THCE细胞与人角膜上皮有相似的TLR表达谱;LPS和PolyI:C刺激THCE1、4、8h后IL8分泌增加,8h时分别达到对照组的10倍和7倍(均P<0.05),抗体封闭TLR4可以阻断LPS诱导的IL8分泌。结论人角膜上皮表达TLR1~9,但不同TLRs表达水平有差异。THCE是研究人角膜上皮TLR表达和功能的良好细胞系。
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单位山东大学齐鲁医院