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摘要
前列腺素F2α(ProstaglandinF2α，PGF2α)具有广泛的生理活性，是一种重要的脂质介质。为了实现PGF2α的绿色生物合成，本研究构建了pET30a-TbPGFS、pET30a-MmPGHS、pET30a-GvPGHS载体并在大肠杆菌BL21（DE3）中分别表达，进一步对诱导条件进行了优化以提高重组蛋白在大肠杆菌中的表达量。结果显示，MmPGHS在大肠杆菌中没有表达；GvPGHS蛋白的最佳诱导表达条件为：诱导剂IPTG浓度为0.2 mmol/L，诱导温度30 ℃，诱导时间2 h；TbPGFS蛋白的最佳诱导表达条件为：诱导剂IPTG浓度为0.2 mmol/L，诱导温度30 ℃，诱导时间6 h。在蛋白最佳诱导表达条件下，由GvPGHS和TbPGFS的粗酶液构成的双酶催化未能检测到产物PGF2α，而在酶偶联化学催化时，GvPGHS能将花生四烯酸转化为PGH2，PGH2被SnCl2进一步还原为PGF2α。本研究为通过体外酶促反应高效转化花生四烯酸生产PGF2α提供了借鉴。
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