养阴方对HSP65攻击下ApoE-/-小鼠Th17、Treg细胞失衡的作用研究

作者：邱润泽; 周李煜; 马元婧; 马玉清; 袁冬平^*; 龙军^*

来源：中草药, 2019, 50(05): 1122-1130.

• 养阴方
• 热休克蛋白65
• 动脉粥样硬化
• 载脂蛋白E
• 辅助性T细胞17
• 调节性T细胞

目的考察在热休克蛋白(HSP)65攻击下养阴方对载脂蛋白E敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化(AS)的病变及辅助性T细胞17(Th17)、调节性T细胞(Treg)的影响及可能机制。方法将ApoE-/-小鼠分别饲喂普通和高脂饲料,并分别sc无菌PBS或HSP65,以辛伐他汀为阳性药,研究养阴方对AS模型小鼠血脂、斑块、Th17细胞与Treg细胞比例(Th17/Treg)及相关炎症指标的影响。给药方式皆为ig给药,并以等体积生理盐水做对照。采用酯酶法检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)及高密度脂蛋白(HDL)水平;油红O染色法测定主动脉斑块面积;流式细胞术测定抗凝血中IL-17A+CD4+Th17及Foxp3+CD25+CD4+Treg细胞数量;ELISA法测定血清白细胞介素-6(IL-6)、IL-17、IL-2、转化生长因子-β(TGF-β)、IL-10水平;实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法测定脾脏中Stat3、Stat5a、Foxp3和主动脉中Stat3、Stat5a mRNA表达;Western blotting法测定脾脏中磷酸化STAT3(pSTAT3)、磷酸化STAT5(pSTAT5)、FOXP3和主动脉中pSTAT3蛋白表达。结果养阴方使小鼠血清TC、TG、LDL水平显著降低(P<0.01),HDL显著升高(P<0.05);主动脉斑块面积明显减小(P<0.01);外周血IL-17A+CD4+Th17细胞显著减少(P<0.05),Foxp3+CD25+CD4+Treg显著增加(P<0.05),Th17/Treg值大幅下降(P<0.01);血清IL-6水平显著下降(P<0.05),IL-2(P<0.01)、TGF-β(P<0.05)、IL-10(P<0.05)水平显著升高;脾脏pSTAT3蛋白水平下降(P<0.01),pSTAT5(P<0.01)和FOXP3(P<0.05)蛋白水平上升;主动脉Stat3 mRNA(P<0.01)和pSTAT3蛋白(P<0.05)水平下降。结论养阴方能够改善HSP65攻击下ApoE-/-小鼠的高脂血症及AS,同时调节外周血中Th17/Treg的平衡和炎症因子的分泌从而改善炎症。养阴方对Th17、Treg的效应可能与减弱的IL-6/pSTAT3和增强的IL-2/pSTAT5信号有关。

• 单位
  南京中医药大学