改良去污剂联合酶法制备兔气管脱细胞基质及其性能研究

作者：王志豪; 潘子寅; 马骏; 潘枢; 张国中; 史宏灿^*

来源：中华实验外科杂志, 2019, 36(09): 1554-1557.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2019.09.009

• 脱细胞
• 组织工程
• 气管
• 细胞外基质

目的 通过改良去污剂联合酶法(DEM)制备周期短、成本低的兔气管脱细胞基质并评价其性能。方法 采用改良DEM对新西兰大白兔气管进行脱细胞处理,通过宏观测量和生物力学测试分析脱细胞基质力学结构；组织学染色观察基质微观结构改变；细胞毒性试验检测基质的体外生物相容性；同种异体埋植术后苏木精-伊红(HE)染色和CD68分子标记评估基质的体内生物相容性；采用t检验和方差分析对各组数据进行统计学分析。结果 2个改良DEM周期处理后,弹性模量[(0.544±0.073) N/mm2]较原生气管[(0.598±0.042) N/mm2]仅轻微下降；组织学染色显示上皮和黏膜层细胞被完全去除,糖胺聚糖含量下降；免疫组织化学染色显示,脱细胞后非软骨区主要组织相容性复合体(MHC)低表达；细胞计数试剂盒(CCK-8)证实在第3～5天骨髓间充质干细胞在2周期组表达高于原生组(第5天,0.484±0.027比0.421±0.014),差异有统计学意义(t＝－3.557,P<0.05)；术后染色表明脱细胞基质的结构保持相对完整,炎性细胞浸润较少。结论 经过2个周期的改良DEM处理,可获取与原生气管结构及生物力学性能相似、低免疫原性的兔脱细胞气管基质。本方案制备周期短、成本低、污染风险小,可用于组织工程气管移植研究。

• 单位
  扬州大学