摘要
目的探讨高钠饮食对小鼠肾脏钾通道蛋白(renal outer medullary potassium channel, ROMK)表达的调控作用及其分子机制。方法雄性FVB小鼠分为两组,分别给与钠盐含量4%的高钠饮食和钠盐含量0.4%的普钠饮食2周,收集小鼠24h尿液,生化分析仪检测小鼠24h尿钠、尿钾情况,Western blot和Real time PCR分析高钠饮食小鼠肾脏ROMK表达,免疫沉淀探讨高钠饮食小鼠肾脏ROMK蛋白泛素化修饰水平。利用蛋白酶体抑制剂MG132处理高钠饮食小鼠三天,分别应用20S蛋白酶体活性检测法、Western blot和免疫沉淀分析MG132对高钠饮食小鼠肾脏蛋白酶体活性、ROMK蛋白表达及泛素化修饰水平的影响。结果高钠饮食2周后,小鼠24h尿量、尿钠及尿钾排泄明显增加,肾脏ROMK蛋白及其mRNA表达显著增高,ROMK蛋白泛素化水平显著降低。应用蛋白酶体抑制剂MG132后,高钠饮食小鼠肾脏蛋白酶体活性降低,ROMK蛋白表达及泛素化修饰水平均增加。结论高钠饮食引起尿钾排泄增多与上调小鼠肾脏Romk基因转录水平、下调ROMK蛋白泛素化修饰水平,抑制ROMK蛋白降解,增加小鼠肾脏ROMK表达相关。
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单位中国医科大学; 生命科学学院