大鼠心肌干细胞的体外分离培养和生物学特性鉴定

作者：王彤; 万智; 黄辉; 符岳; 黄子通

来源：岭南急诊医学杂志, 2008, (02): 81-83.

DOI：10.3969/j.issn.1671-301X.2008.02.001

• 心肌干细胞
• 细胞分离
• 细胞培养
• 流式细胞仪
• 大鼠 cardiac stem cells
• cell isolation
• cell culture
• flow cytometry
• rat

目的:建立稳定的大鼠心肌干细胞(Cardiac stem cells,CSCs)分离和培养方法,以及对体外培养的CSCs进行生物学特性鉴定。方法:健康Sprague-Dawley(SD)3天龄新生鼠,在无菌条件下取出心脏,尽量剪碎成1mm3的碎块,经胰酶及胶原酶反复消化后,所得的细碎心肌组织块种植于培养皿中原代培养,视生长情况进行传代培养,第三代细胞进行流式细胞仪表面标记鉴定。结果:从新生鼠心脏中成功地培养出心肌干细胞,具有干细胞附壁生长及不断增殖的典型特征,原代细胞长满25cm2瓶壁所需要的时间平均为(11±2)天,平均每三天需按1∶2的比例传代一次。第三代CSCs流式细胞仪表面标记鉴定结果为c-kit,CD29,CD90.1为阳性;CD11b/c,CD34,CD45为阴性。结论:本方法可以对大鼠心肌干细胞进行成功的分离和体外培养。大鼠CSCs体外生长相对稳定,具有很强的扩增能力,短期内可获得大量CSCs,提示体外培养CSCs可以满足组织工程和细胞治疗的需要。

• 单位
  四川大学华西医院; 中山大学