STAT3调控炎症因子分泌抑制脑梗死细胞凋亡机制研究

作者：贾丹丹^*; 陈蓉; 马琳; 李其富

来源：分子诊断与治疗杂志, 2023, 15(09): 1524-1529.

DOI：10.19930/j.cnki.jmdt.2023.09.043

• STAT3
• NLRP3炎症小体
• 炎症因子分泌
• 脑梗死

目的 初步探讨信号转导和转录活化因子3(STAT3)在脑梗死细胞凋亡相关机制中的作用。方法 首先，构建小鼠脑梗死（MCAO）和大鼠神经元细胞培养和氧-葡萄糖剥夺（OGD）模型，采用实时荧光定量PCR(qPCR)和蛋白免疫印迹（WB）检测脑组织中STAT3 mRNA和蛋白表达。然后，C57BL/6小鼠注射AAV9-sh-STAT3腺相关病毒3周后构建抑制STAT3表达的MCAO模型，采用qPCR检测STAT3 mRNA表达，采用WB检测凋亡相关蛋白Bcl-2相关X蛋白（Bax）和B淋巴细胞瘤-2(Bcl2)表达，采用Tunle染色检测细胞凋亡情况。接着，小鼠神经元细胞转染Sh-STAT3和OE-STAT3慢病毒，构建抑制和过表达STAT3模型，采用qPCR和WB检测NLRP3 mRNA和蛋白表达。小鼠注射AAV9-sh-STAT3和AAV9-OE-NLRP3腺相关病毒，构建抑制STAT3和过表达NLRP3的MCAO模型，采用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测小鼠血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子-β(TGF-β)的表达。此外，大鼠神经元细胞转染Sh-STAT3和OE-NLRP3慢病毒48 h后构建抑制STAT3表达和过表达NLRP3的OGD模型，采用WB检测凋亡相关蛋白Bax和Bcl2表达，采用Tunle染色检测细胞凋亡情况。结果 qPCR和WB检测结果显示，STAT3在MCAO和OGD的脑神经元细胞中表达升高（P<0.05）。WB和Tunel染色结果显示，小鼠脑组织敲低STAT3,MCAO导致的细胞凋亡受到抑制（P<0.05）。此外，STAT3通过调控NLRP3抑制IL-1β、TNF-α、IL-10和TGF-β表达（P<0.05），过表达NLRP3可降低STAT3对MCAO小鼠细胞凋亡的保护效果（P<0.05）。结论 STAT3可通过调控NLRP3炎症小体介导的炎症因子分泌抑制脑梗死小鼠细胞凋亡。

• 单位
  海南医学院第一附属医院; 神经内科