科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的 探讨5-羟基色氨酸(5-HTP)对阿霉素(Dox)诱导的心肌损伤的保护作用及其机制。方法 将H9c2细胞随机分为对照组、模型组(5μmol/L Dox)、阳性药物保护组(5μmol/L Dox+20μmol/L Dexra)、5-HTP保护组(5μmol/L Dox+20μmol/L 5-HTP),经药物干预24 h后，分别测定各组细胞的细胞存活率、乳酸脱氢酶(LDH)漏出量、细胞凋亡情况、活性氧(ROS)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性、三磷酸腺苷(ATP)水平及线粒体膜电位变化情况；采用Western Blot方法检测各组细胞中小G蛋白Rho相关激酶1(Rock-1)、核因子E2相关因子2(Nrf-2)、沉默调节蛋白1(Sirt-1)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白的表达水平。将32只雌性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组(仅第1天腹腔注射Dox 10 mg/kg)、阳性药物保护组(模型组处理基础上再腹腔注射14.3 mg/kg Dexra连续7 d)和5-HTP保护组(模型组处理基础上再用5-HTP 30 mg/kg连续灌胃7 d),通过超声心电图检测各组小鼠射血分数(EF%)和短轴缩短率(FS%),使用HE染色评估小鼠心脏组织形态，测定小鼠血清中心肌肌钙蛋白的含量。RT-qPCR法测定对照组、模型组及5-HTP保护组小鼠心脏组织中凋亡相关基因含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(Casp1)、Casp2、B淋巴细胞瘤-2关联X(Bax)及B淋巴细胞瘤-2基因相关启动子(Bad)的相对表达水平。结果 对照组和5-HTP保护组H9c2细胞的LDH漏出量、细胞凋亡率、ROS水平、SOD活性、线粒体膜电位、ATP水平及Bcl-2、Sirt-1、Nrf-2、Rock-1蛋白表达水平与模型组相比，差异均有显著性(F=17.15～238.27,P<0.05),阳性药物保护组细胞的ROS水平、SOD活性、线粒体膜电位及Bcl-2、Nrf-2和Rock-1蛋白表达水平与5-HTP保护组相比，差异有显著性(P<0.05)。对照组和5-HTP保护组小鼠的EF%、FS%与血清中心肌肌钙蛋白水平以及心脏组织中基因Casp1、Casp2、Bax及Bad的相对表达水平与模型组相比，差异有显著性(F=6.91～59.69,P<0.05)。HE染色结果显示，模型组小鼠心肌细胞排列间隙较正常组变大，有炎性细胞浸润，5-HTP保护组和阳性药物保护组均能有效改善小鼠心肌组织形态学的变化。结论 5-HTP通过缓解氧化应激水平维持细胞线粒体功能，进而对Dox所致的心肌细胞损伤产生保护作用。
- 单位
