WZB117下调YAP影响胃癌细胞干性和糖酵解的机制

作者：张晨嵩; 潘成武; 王庆康; 李靖; 汪虎; 马家驰^*

来源：安徽医科大学学报, 2021, 56(08): 1241-1246.

DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2021.08.014

• WZB117
• 胃癌
• Yes相关蛋白
• 癌细胞干性
• 糖酵解

目的探究糖酵解抑制剂WZB117通过下调Yes相关蛋白(YAP)影响病人来源的胃癌细胞干性和糖酵解的机制。方法胰蛋白酶消化临床获取的胃癌组织,培养制备胃癌细胞;细胞分为正常组、低糖对照组和WZB117处理组,qRT-PCR检测细胞干性相关基因(Nanog、oct-4、sox-2)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和凋亡相关基因(Bcl-2、bax和Cyt-C)的表达;Western blot测定细胞中YAP和代谢相关蛋白己糖激酶2(HK2)、丙酮酸激酶M2亚型(PKM2)和活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)的表达;MTT测定细胞增殖活性;平板克隆实验测定细胞克隆形成能力;划痕试验观察细胞迁移能力;Transwell实验观察细胞的侵袭能力;试剂盒测定细胞中三磷酸腺苷(ATP)及培养液上清液中的乳酸含量。结果 WZB117培养细胞后,YAP表达水平较正常组及低糖对照组显著降低(P<0.05);Nanog、BMil、c-Myc的表达以及细胞增殖活性、克隆形成率、侵袭能力、迁移能力降低(P<0.05);Cleaved Caspase-3水平及细胞凋亡率升高(P<0.05);Bcl-2表达随WZB117浓度增高而降低(P<0.05);Bax和Cyt-C表达随WZB117浓度增高而升高(P<0.05);ATP、上清液中乳酸含量以及HK2、PKM2蛋白水平降低(P<0.05)。结论抑制剂WZB117可通过下调胃癌细胞中YAP表达,干扰糖酵解关键酶HK2、PKM2的表达,抑制胃癌细胞糖酵解,降低细胞ATP水平。

• 单位
  蚌埠医学院第一附属医院