细粒棘球绦虫肌动蛋白基因的克隆表达

作者：高瑞雪; 李超群; 张耀刚; 李凤辉; 赵婧; 姜博璠; 张发斌^*

来源：中国高原医学与生物学杂志, 2020, 41(02): 111-124.

DOI：10.13452/j.cnki.jqmc.2020.02.007

• 细粒棘球绦虫
• 肌动蛋白
• 基因
• 克隆
• 原核表达

目的克隆表达细粒棘球绦虫肌动蛋白(EgACT)基因,并获得EgACT纯化蛋白。方法将经全序列合成、密码子优化合成的目的基因EgACT克隆入PET28a-SUMO表达载体中、转化入Rosetta(DE3)中,诱导表达采用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG),经镍琼脂糖凝胶亲和层析法获得纯化蛋白。结果重组质粒PET28a-SUMO-EgACT构建成功。SDS-PAGE结果显示,目的蛋白在Rosetta(DE3)中获得高效表达,相对分子量约为60 kDa。结论完成细粒棘球绦虫肌动蛋白基因的克隆及其在Rosetta(DE3)中的表达,并获得纯化蛋白。

• 单位
  青海大学