摘要

为建立适合新疆野生欧洲李的ISSR-PCR反应体系,本研究以野生欧洲李为供试材料,采用L_(16) (4~(5))正交试验设计和单因素试验设计相结合的方法,对影响野生欧洲李ISSR-PCR反应体系的5个因素(DNA模板、Taq酶、dNTPs、引物、Mg~(2+))进行筛选与优化,对16条引物的退火温度进行筛选。结果表明,Taq酶对PCR扩增反应的影响最大,野生欧洲李ISSR-PCR最佳反应体系为:总体积20 μL,5 U Taq酶0.10 μL,10 mmol/L引物1.00 μL,2.5 mmol/L dNTPs 1.50 μL,10×Buffer (含Mg~(2+)) 2.00 μL,50...