Beclin-1调控p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路对缺氧复氧心肌细胞氧化损伤影响及临床意义

作者：姬建胜; 徐宏耀; 王平凡; 高廷朝

来源：中华实验外科杂志, 2018, 35(09).

• 缺氧复氧
• 心肌细胞
• 氧化损伤
• Beclin-1
• p38丝裂原活化蛋白激酶

目的观察Beclin-1调控p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路对缺氧复氧(H/R)心肌细胞氧化损伤的影响。方法 H9C2细胞给予缺氧复氧(H/R),Beclin-1 siRNA转染及p38MAPK抑制剂SB203580处理,分为对照组(Con)、H/R、Beclin-1 siRNA+H/R、SB+H/R组和Beclin-1 siRNA+SB+H/R组。定量聚合酶链反应(PCR)和Western blot检测细胞中Beclin-1及下游蛋白表达,流式细胞术检测细胞凋亡,黄嘌呤氧化法检测心肌细胞中超氧化物歧化酶Orgotein(SOD)水平,硫代巴比妥酸比色法检测细胞中丙二醛(MDA)水平,二硝基苯肼显色法检测上清中乳酸脱氢酶(LDH)水平。结果 H9C2细胞经H/R处理,细胞中Beclin-1 mRNA和蛋白水平均明显高于Con(t1=8.205, P1=0.001;t2=5.583,P2=0.011),细胞凋亡率由(6.47±0.84)%增加为(36. 18±2.69)%(t=18.260,P=0.000),细胞中MDA和LDH水平升高(t1=11.596,P1=0.000;t2=18.709,P2=0.000),SOD水平下降(t=-8.041,P=0.001)。Beclin-1敲除或p38MAPK抑制剂SB203580处理H/R细胞,细胞凋亡率下降(t1=-3.971,P1=0.016;t2=-6.100,P2=0.003),降低细胞中MDA(t1=-5.567,P1=0.005;t2=-3. 325,P2=0.029)和LDH(t1=-4.850,P1=0.008;t2=-2.668,=0.055),SOD水平升高(t1=4.103,P1=0.014;t2=2. 594, P2=0.060),下调Cleaved Caspase-3 (t1=16. 705,P1=0. 000; t2=16. 623,P2=0. 000)及p-p38MAPK (t1=-5. 448,P1=0. 005;t2=-3.421,P2=0. 027)的表达,上调第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)的表达(t1=7.574,P1=0.002;t2=10. 549,P2=0.001)。结论缺氧复氧诱导心肌细胞氧化损伤,抑制Beclin-1/p38MAPK信号通路,减轻细胞凋亡和氧化应激,发挥心肌保护作用。

• 单位
  河南省胸科医院