马甲子对大鼠炎性肠病的干预及基于转录组学的机制研究

作者：谢林碧; 郑文浩; 赵欢; 白筱璐; 胡竟一; 雷玲; 余悦; 吴瑕; 李东晓^*

来源：中药药理与临床, 2023, 39(05): 69-75.

DOI：10.13412/j.cnki.zyyl.20230523.001

• 马甲子
• 炎性肠病
• IL-17信号通路
• CCATT/增强子结合蛋白β
• 糖原合成酶激酶3β

目的:评价马甲子提取物对大鼠实验性炎性肠病(Inflammatory bowel disease, IBD)的干预作用，探讨其作用机制。方法:以2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)为致炎剂复制大鼠IBD模型，灌胃给予马甲子，观察疾病活动指数(DAI)、结肠粘膜损伤指数(CMDI)、结肠长度、结肠组织病理、血清炎症相关因子白介素-6(Interleukin-6,IL-6)、IL-1β、肿瘤坏死因子(Tumour necrosis factor-α,TNF-α)、环氧合酶2(Cyclooxygenase 2,COX2)等指标；采用转录组测序(RNA-Seq)筛选差异基因，免疫蛋白印迹法(Western blot, WB)检测相关基因的蛋白表达。结果:马甲子820 mg/kg组可减轻IBD大鼠结肠组织炎症，显著增加结肠长度(P<0.01),明显降低血清中IL-6、IL-1β、TNF-α、COX2含量(P<0.05或P<0.01)。马甲子820 mg/kg组共筛选出514个差异基因(|lg2 Fold change|≥1.5,P<0.01),主要涉及IL-17信号通路(IL-17 signal pathway)、cAMP信号通路(cAMP signal pathway)等；其中与IBD密切相关的IL-17信号通路中，与模型对照组比较，马甲子820 mg/kg组可下调CCATT/增强子结合蛋白β(CCAAT/enhancer binding proteinβ,C/Ebpb)、丝裂原活化蛋白激酶家族(Mitogen active protein kinases,Mapks)以及下游炎症因子IL-1β、C-C趋化因子7(C-C motif chemokine 7,Ccl7)、S100钙结合蛋白A8(S100 Calcium Binding Protein A8,S100a8)、Cox2基因的表达；WB结果显示马甲子820 mg/kg组干预后IL-17信号通路中糖原合成酶激酶3β(Glycogen synthase kinase 3β,GSK3β)蛋白表达上调(P<0.01),C/EBPβ蛋白表达下调(P<0.01)。结论:马甲子能明显改善IBD大鼠的结肠炎性损伤，其作用机制可能与上调GSK3β蛋白表达，下调C/EBPβ的表达，从而影响下游炎症因子COX2、IL-6、IL-1β、TNF-α、CCL7、S100A8水平有关。

• 单位
  四川省中医药科学院; 成都中医药大学