摘要
本研究以白花油茶未成熟胚为外植体,对其消毒方式及胚性愈伤组织培养进行研究。结果表明,未剥果皮的外植体先用75%乙醇浸泡60 s后转入0.1%HgCl2浸泡8 min,再转入2%NaClO中浸泡8 min,成活率最高,达86.67%。未成熟胚切块接种于MS+0.5 mg·L-1 2,4-D+2.0 mg·L-1 6-BA中,胚性愈伤组织诱导最好,诱导率最高,达89.63%;将绿色愈伤组织转接至MS+0.2 mg·L-1 NAA+1.0 mg·L-1 6-BA时,愈伤组织表面及其周围产生大量体细胞胚,呈球形、心形、鱼雷状和子叶状等多种形状,且多种相互重叠生长,胚状体诱导率最高,达68.89%;不同配比的6-BA和NAA诱导体细胞胚产生不定芽的效率差异明显,其中2.25 mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1 NAA和3.0 mg·L-1 6-BA+1.0 mg·L-1 IBA不定芽分化效果最好,诱导率均达90%以上。待不定芽长至1.5~2.0 cm切下进行生根培养,发现添加5 mg·L-1 NAA和添加5 mg·L-1 NAA+5 mg·L-1 IBA的生根效果较好,分别达77.78%和81.11%,前者只有主根,侧根较少产生,后者主根生长健壮,侧根稠密。初步建立了白花油茶胚性愈伤组织诱导及植株再生体系,为遗传转化提供技术支撑。
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单位连云港市农业科学院