miR-31靶向SATB2对结肠癌上皮细胞HCT116焦亡的促进作用

作者：张文琴; 都新新; 张一楠; 任彩佩; 崔香丽^*

来源：中国生物制品学杂志, 2022, 35(11): 1310-1316.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.003751

• miR-31
• SATB2
• 细胞焦亡
• 结肠癌上皮细胞HCT116

目的 探讨miR-31通过靶向SATB2对结肠癌上皮细胞HCT116焦亡的促进作用，以期为结肠癌发病机制的研究及治疗提供新的靶标。方法 常规培养HCT116细胞，采用脂质体瞬时转染方法转染miR-31 mimic(miR-31模拟物)和miR-31 inhibitor(miR-31抑制剂)分别过表达和敲低miR-31，转染si-SATB2敲低SATB2的表达；另转染pEXPRB-Mam-SATB2质粒（过表达SATB2）和pEXP-RB-Mam质粒（空载体）。试验均设加入无血清、无青链霉素的DMEM的细胞作为对照，均重复3次。72 h后收集各组细胞，提取蛋白，Western blot方法检测SATB2及焦亡信号通路相关蛋白NLRP3、胱天蛋白酶（Caspase）-1、胃泌素蛋白D(gasdermin D,GSDMD)-N、IL-18和IL-1β的表达。结果 与对照组相比，miR-31过表达组和敲低SATB2组细胞SATB2蛋白的表达水平均显著下降（t分别为4.677和4.463,P分别<0.01和<0.05）,NLRP3、Caspase-1、GSDMD-N、IL-18和IL-1β蛋白表达水平均显著升高（t=2.859～6.843,P <0.05或<0.01）；敲低miR-31组SATB2蛋白表达水平显著升高（t=3.313,P <0.05）,NLRP3、Caspase-1、GSDMD-N、IL-18和IL-1β蛋白表达水平均显著下降（t=2.747～3.545,P <0.05或<0.01）。与对照组相比，空载体组SATB2、NLRP3、Caspase-1、GSDMD-N、IL-18和IL-1β蛋白表达水平差异均无统计学意义（t=0.033 10～0.811 1,P均>0.05）;SATB2过表达组SATB2蛋白表达水平显著升高（t=6.186,P <0.01）,NLRP3、Caspase-1、GSDMD-N、IL-18和IL-1β蛋白表达水平均显著下降（t=2.963～7.894,P <0.05或<0.01），与敲低miR-31组趋势一致。结论 miR-31通过靶向SATB2上调HCT116细胞中经典的细胞焦亡信号通路蛋白的表达，促进细胞焦亡。

• 单位
  山西医科大学