非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体的制备及阻断ELISA抗体检测方法的建立

作者：周改静; 罗俊聪; 石正旺; 万颖; 杨波; 曹丽艳; 宋锐; 田宏^*; 郑海学^*

来源：畜牧兽医学报, 2022, 53(12): 4337-4345.

• 非洲猪瘟病毒
• p30蛋白
• 单克隆抗体
• 阻断ELISA

为建立检测非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体的阻断ELISA方法，本研究利用原核表达的ASFV p30重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体。以重组p30蛋白作为包被抗原，以辣根过氧化物酶(HRP)标记的p30单克隆抗体作为检测抗体，经条件优化，建立了一种检测ASFV抗体的阻断ELISA方法。ROC曲线分析显示，该方法最佳阻断率临界值为16.63%。该方法与CSFV、FMDV-O/A、PRRSV、PEDV、SVA的阳性血清均无交叉反应；最低能检出1∶128稀释的阳性血清；批内和批间变异系数(CV)均<10%。用本方法与商品化试剂盒平行检测208份血清样品，Kappa值为0.96,表明具有高度一致性。上述结果表明，本研究建立的阻断ELISA方法具有较高的特异性和敏感性，可用于血清ASFV抗体的检测，为ASFV流行病学调查及猪群疫情监控提供技术支持。

• 单位
  家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 中国农业科学院兰州兽医研究所