活性污泥中一氧化氮还原酶的提取和测定优化

作者：杨睿; 袁林江; 王刚; 袁林杰; 有小龙; 牛晚霞; 于丽萍

来源：中国环境科学, 2021, 41(11): 5169-5176.

DOI：10.3969/j.issn.1000-6923.2021.11.024

• 氧化亚氮
• 污泥膨胀
• 一氧化氮还原酶
• 提取
• 测定

通过正交实验,研究了超声破碎法和低温高压破碎法提取一氧化氮还原酶(nitric oxide reductase,nor)的活性,分析了超声强度和次数,破碎压力和次数,裂解液的添加量等因素对于胞内可溶性蛋白和核酸(DNA)的释放与提取nor活性的影响.根据活性污泥中酶的催化特性以及其他实验条件,完善了nor催化活性的测定方法.结果 表明超声法提取nor的参数应设定为,超声次数为100次,超声强度为500W,裂解液的添加量为0.1mL.低温高压破碎法提取nor的参数应设定为破碎次数为4次,破碎压力为50MPa,裂解液的添加量为0.1mL.低温高压破碎法下的胞内可溶性蛋白和DNA的释放量与nor的最大催化活性要高于超声破碎法.此外,在nor催化活性的测定方法中,nor活性测定终点时间应为15min.

• 单位
  西安建筑科技大学