摘要
目的探讨高强度聚焦超声(HIFU)辐照对人胰腺癌移植瘤凋亡相关基因的影响。方法建立裸小鼠人胰腺癌YY-1细胞移植瘤模型并进行HIFU辐照, 同时设置对照组, 用原位末端转移酶标记(TUNEL)法检测肿瘤细胞凋亡率, Agilent人类基因表达谱芯片分析凋亡相关的差异性基因变化, 反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白印迹法(Western blot)对筛选出的部分基因进行验证。结果治疗后第7、14天, 辐照组肿瘤细胞凋亡率均高于对照组, 凋亡率分别为[(63.6%±15.2%)比(19.0%±2.4%), P<0.01]、[(41.4%±7.3%)比(18.0%±2.4%), P<0.01]。表达谱芯片分析示与凋亡信号传导通路相关的差异表达基因共69个, 其中上调基因44个, 下调基因25个。选取其中4条基因进行RT-PCR验证, 其表达结果与芯片结果一致;Western印迹结果示治疗后第7、14天, 辐照组Bax蛋白相对表达量高于对照组, 分别为[(0.39±0.11)比(0.20±0.09), P<0.05]和[(0.46±0.12)比(0.24±0.10), P<0.05]; Bcl-2蛋白相对表达量低于对照组, 分别为[(0.68±0.14)比(1.56±0.21), P<0.05]和[(0.51±0.16)比(1.57±0.22), P<0.05]。结论 HIFU辐照可引起多基因表达改变, 通过调控多个信号通道促进肿瘤细胞凋亡, 外源性凋亡通道可能发挥主要作用, 结合进一步研究有助于阐释HIFU调控凋亡的机制。
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单位天津医科大学; 天津市滨海新区大港医院