牛支原体牛多杀性巴氏杆菌与牛传染性鼻气管炎病毒三重PCR方法的建立与初步应用

作者：白和平; 赵桂新; 王凤杰; 刘畅; 张艳英; 高艺祥; 张志强; 史秋梅; 吴同垒^*

来源：中国兽医科学, 2023, 53(05): 572-577.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2023.0067

• 三重PCR
• 牛支原体
• 多杀性巴氏杆菌
• 牛传染性鼻气管炎病毒

为建立一种可同时检测牛支原体(MB)、多杀性巴氏杆菌(PM)与牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的三重PCR检测方法，笔者设计1对特异性引物，引用文献的2对引物，对反应条件与反应体系进行优化，建立了一种三重PCR检测方法，并对其特异性、敏感性和重复性进行了验证。结果显示，最佳退火温度为51.7℃，最佳引物终浓度均为0.5μmol/L；敏感性结果显示，MB、PM、IBRV的最低检出限分别为3.9×10-3ng/μL、6.61×10-2ng/μL与2.97×10-2ng/μL；特异性结果显示该方法只能特异性检测出MB、PM和IBRV。利用建立的三重PCR方法对108份临床病料进行检测，结果与单一PCR一致。结果表明，该方法可用于临床快速检测MB、PM、IBRV。

• 单位
  河北科技师范学院