胚胎大鼠神经干细胞体外培养及分化为类毛细胞的研究

作者：陈请国; 龚树生; 付勇; 王显红; 吴小慧; 谢静; 李欣; 李泽文

来源：中国耳鼻咽喉头颈外科, 2008, (07): 404-407.

DOI：10.3969/j.issn.1672-7002.2008.07.008

• 大鼠
• 胚胎
• 干细胞
• 毛细胞

目的探讨体外培养和鉴定胚胎大鼠神经干细胞(neural stem cells,NSCs)及诱导其分化为类毛细胞。方法从SD系胚鼠大脑分离NSCs,在无血清培养基中培养,用含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基诱导其分化为神经元和星形胶质细胞:将NSCs球放到含鼠尾胶原包被的盖玻片6孔培养板中培养,然后将乳鼠基底膜体外培养后汲取其上清液与NSCs一起培养,14～21天后通过免疫荧光和免疫组化法检测毛细胞标志物肌球蛋白(myosin)Ⅶa和钙视网膜蛋白(calretinin)。结果培养的NSCs胞体透亮,折光性好,分化后的细胞免疫组化示神经元特异性烯醇化酶、胶原纤维酸性蛋白、myosinⅦa和calretinin阳性。结论在无血清条件下能培养出活性很好的NSCs,并且能诱导其分化为神经元、星形胶质细胞和类毛细胞。

• 单位
  咸宁学院; 首都医科大学附属北京同仁医院; 华中科技大学同济医学院附属协和医院; 浙江大学附属第一医院