布托啡诺对白细胞介素-1β诱导的关节软骨细胞焦亡的影响及机制研究

作者：张玲; 陈尧; 尹航; 程超^*

来源：陕西医学杂志, 2023, 52(12): 1665-1674.

• 骨关节炎
• 布托啡诺
• NOD样受体蛋白3
• 半胱天冬酶-1
• 白介素-1β
• 细胞焦亡

目的:探讨布托啡诺(BT)对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的关节软骨细胞焦亡的影响及相关机制。方法:取对数生长期HC-a细胞，分为对照组、IL-1β组(给予10 ng/ml IL-1β)、BT低浓度(BT-L)组(给予10 ng/ml IL-1β+1μmol/L BT)、BT中浓度(BT-M)组(给予10 ng/ml IL-1β+2μmol/L BT)、BT高浓度(BT-H)组(给予10 ng/ml IL-1β+4μmol/L BT)、BT-H+NOD样受体蛋白3(NLRP3)激活剂(ATP)组(给予10 ng/ml IL-1β+4μmol/L BT+3 mmol/L ATP)。除对照组外，其余各组均经相应浓度物质处理HC-a细胞。48 h后，倒置显微镜观察各组细胞形态变化；MTT法检测细胞增殖率；Hoechst 33342/碘化丙啶(PI)染色检测细胞焦亡变化；实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞NLRP3、半胱天冬酶-1(Caspase-1)、IL-1β mRNA表达；ELISA法检测细胞一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及IL-6水平；Western blot检测NLRP3/Caspase-1信号通路及IL-1β表达水平。结果:与对照组比较，IL-1β组PI阳性细胞率，NO、IL-6、TNF-α水平，IL-1β、Caspase-1、NLRP3蛋白及mRNA表达增加，细胞增殖率显著下降(均P<0.05)。与IL-1β组比较，BT-L、BT-M、BT-H组PI阳性细胞率，NO、IL-6、TNF-α水平，IL-1β、Caspase-1、NLRP3蛋白及mRNA表达下降，细胞增殖率显著增加且呈剂量依赖性(均P<0.05)。与BT-H组比较，BT-H+ATP组PI阳性细胞率，NO、IL-6、TNF-α水平，IL-1β、Caspase-1、NLRP3蛋白及mRNA表达增加，细胞增殖率显著下降(均P<0.05)。结论:BT可以抑制IL-1β诱导的关节软骨细胞焦亡，其机制可能与抑制NLRP3/Caspase-1信号通路有关。