大熊猫犬瘟热抗体间接ELISA方法的初步建立及应用

作者：潘广林; 赵鹏鹏; 高更更; 雷颖虎; 骆琛^*; 王兴龙^*

来源：中国兽医学报, 2021, 41(08): 1501-1505.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2021.08.09

• 大熊猫
• 犬瘟热
• 间接ELISA

为建立大熊猫犬瘟热血清抗体间接ELISA检测方法,用合成的犬瘟热病毒(canine distemper virus, CDV)H和F短肽作为包被抗原,分别以HRP标记的鼠抗大熊猫IgG Fc二抗、HRP标记兔抗犬IgG二抗、HRP标记SPA作为检测二抗,通过矩阵法优化抗原包被浓度、血清稀释度和酶标二抗稀释度,评估3种方法的符合率、敏感性和重复性,建立3种大熊猫犬瘟热血清抗体ELISA检测方法,并用该方法检测大熊猫2次免疫犬瘟热疫苗的血清抗体。结果显示,抗原最佳包被质量浓度为25 mg/L,血清最佳稀释度为1∶100,3种二抗的最佳稀释度分别1∶1 000,1∶1 000,1∶500,3种方法的符合率分别为100%,92%,100%,敏感性分别为1∶400,1∶100,1∶100,3种方法的重复性较好,批内和批间变异系数均小于10%。对大熊猫血清抗体的检测结果表明,所有血清样本的抗体效价均大于1∶100,50%的血清样本抗体水平相较一免有了显著升高。本研究对3种用于大熊猫犬瘟热血清抗体检测二抗进行评估,为大熊猫犬瘟热ELISA试剂盒的开发、流行病学监测以及疫苗免疫效力的评估提供支撑。

• 单位
  西北农林科技大学