加味丹玄口康对大鼠口腔黏膜下纤维化及其自噬水平的影响

作者：贺珺; 张婷; 胡亮; 潘世杰; 邹红; 连科荃; 谭劲; 胡兆勇^*

来源：中国医药导报, 2023, 20(24): 9-15.

DOI：10.20047/j.issn1673-7210.2023.24.02

• 口腔黏膜下纤维化
• 自噬
• 加味丹玄口康
• 轻链3Ⅱ

目的 探讨加味丹玄口康对大鼠口腔黏膜下纤维化（OSF）及其自噬水平的影响。方法 选取SPF级SD雄性大鼠24只（180～200 g,4～8周龄），采用随机数字表法将其分为空白组、模型组和加味丹玄口康组，每组8只。模型组和加味丹玄口康组在大鼠双侧颊黏膜组织注射槟榔碱0.2 ml(10 mg/ml),1次/2 d，同时每天使用小牙刷沾取适量槟榔碱均匀施力刷大鼠双侧颊黏膜，持续8周，观察到大鼠颊黏膜出现白色病变确认造模成功，空白组不做干预。造模成功后，加味丹玄口康组以8 ml/（kg·d）加味丹玄口康灌胃，空白组和模型组灌胃等量0.9%氯化钠溶液，三组均灌胃4周。实验后取三组双侧颊黏膜进行苏木精-伊红染色和Masson染色观察病理变化和胶原纤维沉积情况，透射电镜观察三组自噬小体数量。采用免疫组织化学染色检测三组上皮钙黏素和微管相关蛋白轻链3(LC3)阳性细胞表达情况；Western blot检测上皮钙黏素、LC3-Ⅱ和选择性自噬接头蛋白p62的表达；RT-PCR检测LC3-Ⅱ和p62 mRNA表达。结果 模型组口腔黏膜上皮明显萎缩，胶原纤维显著变粗、增多，上皮层变薄，黏膜下层胶原纤维大量沉积，加味丹玄口康组口腔黏膜上皮层较厚，胶原纤维减少，上皮层萎缩程度减轻。模型组自噬小体数量低于空白组，上皮钙黏素、LC3阳性细胞数低于空白组，上皮钙黏素、LC3-Ⅱ蛋白表达低于空白组，LC3-Ⅱ mRNA表达低于空白组，p62蛋白及其mRNA表达高于空白组（P<0.05）。加味丹玄口康组自噬小体数量高于模型组，上皮钙黏素、LC3-Ⅱ阳性细胞数高于模型组，上皮钙黏素、LC3-Ⅱ蛋白表达高于模型组，LC3-Ⅱ mRNA表达高于模型组，p62蛋白及其mRNA表达低于模型组（P<0.05）。结论 加味丹玄口康可改善大鼠OSF，可能与其自噬水平一定程度升高有关。

• 单位
  湖南中医药大学; 湖南中医药大学第一附属医院