体内靶向树突状细胞的腺病毒通用肿瘤疫苗的构建

作者：丁振宇; 王椿; 宿静梅; 魏于全; 王春婷

来源：四川大学学报（医学版）, 2009, 40(03): 369-373.

• 端粒酶逆转录酶
• 腺病毒
• 肿瘤疫苗

目的采用细胞菌内同源重组法构建人端粒酶逆转录酶(hTRT)重组腺病毒,并将其以甘露聚糖进行表面修饰,以探索构建一种新型的体内靶向树突状细胞(DC)的通用型肿瘤抗原。方法将编码hTRT的cDNA序列自pBABE-PURO-hTERT质粒亚克隆至腺病毒质粒pAdTrack-CMV中,将后者与骨架质粒pAdEasy-1经电冲击共转化宿主菌BJ5183进行同源重组。经过克隆筛选获得正确的重组腺病毒质粒后,将其线性化转染293细胞包装获得重组腺病毒。将重组腺病毒扩增纯化,以甘露聚糖进行表面修饰。最后将甘露聚糖修饰后的腺病毒免疫小鼠。结果重组腺病毒能在293细胞产生细胞病变效应(CPE),腺病毒转染后的细胞通过PCR及免疫印迹能测到hTRT的表达。重组腺病毒经过甘露聚糖修饰后,经高碘酸席碱染色呈阳性。重组腺病毒能在小鼠体内靶向脾脏DC细胞。结论成功构建能体内靶向DC细胞的hTRT重组腺病毒,为通用型肿瘤疫苗的研发作出了新的探索。

• 单位
  四川大学华西医院; 生物治疗国家重点实验室