人胰岛素样生长因子-1的融合表达及纯化

作者：曹玉锋; 李霄培; 陈子杨; 王健; 常东英; 贾媛; **锋; 吴菲; 王伟善; 时成波

来源：中国生物制品学杂志, 2013, (12): 1725-1728+1733.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.000029

• 胰岛素样生长因子-1
• 融合蛋白
• 原核细胞
• 基因表达
• 硫氧还蛋白A Insulin-like growth factor 1(IGF-1)
• Fusion protein
• Prokaryotic cells
• Gene expression
• Thioredoxin A

目的利用原核表达系统融合表达人胰岛素样生长因子-1(human insulin-like growth factor-1,hIGF-1),并进行纯化及鉴定。方法根据大肠埃希菌密码子偏好性对hIGF-1天然基因序列进行同义突变,并人工合成,PCR扩增后,克隆至pET48b(+)载体,构建重组原核表达质粒,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的融合蛋白Trx A-hIGF-1经Ni2+亲和层析进行纯化,纯化产物经肠激酶酶切后,进行Western blot鉴定。结果重组表达质粒pET48b-Trx A-hIGF-1经菌落PCR及测序证实构建正确;表达融合蛋白相对分子质量约为26 ...

• 单位
  长春生物制品研究所