细胞质核苷酸结合寡聚化域样受体蛋白3炎症小体通路激活对硫酸吲哚酚诱导的心肌细胞肥大蛋白表达的影响

作者：傅强; 刘家超; 杨镒宇; 李志樑; Gael Akindavyi; 刘云峰; 梁建光; 文俪桦^*; 李晚泉^*

来源：中华高血压杂志, 2020, 28(12): 1134-1141.

DOI：10.16439/j.cnki.1673-7245.2020.12.009

• 细胞质核苷酸结合寡聚化域样受体蛋白3
• 炎症小体
• 硫酸吲哚酚
• 心肌肥大
• 尿毒症心肌病

目的探讨硫酸吲哚酚(IS)诱导细胞质核苷酸结合寡聚化域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体通路激活与心肌细胞肥大蛋白表达的关系及可能机制。方法提取原代心肌细胞,分为对照组和IS(10 mmol/L)组,IS干预后检测两组脑钠肽蛋白表达情况。细胞计数套盒8(CCK8)法检测IS刺激小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)的最佳刺激浓度和时间。将RAW264.7分为对照组和IS组,Western blot检测NLRP3、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1前体(Pro-caspase 1)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-18蛋白表达情况。酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测对照组和IS组细胞上清液中炎症因子IL-18和IL-1β水平。将巨噬细胞培养基上清液与心肌细胞直接共培养,分为空白对照组、巨噬细胞培养基组、巨噬细胞培养基+IS组,检测各组NLRP3、Pro-caspase 1、IL-1β、IL-18、脑钠肽蛋白表达情况。结果 IS刺激原代心肌细胞后,心房钠尿肽(ANP)和脑钠肽蛋白表达显著上调。由CCK8法检测发现IS刺激RAW264.7的最佳浓度是15 mmol/L,最佳干预时间为3 h。IS刺激RAW264.7后,与对照组相比炎症相关蛋白NLRP3、Pro-caspase 1、IL-1β、IL-18表达明显增加(均P<0.05)。通过ELISA法检测发现IS组巨噬细胞培养基上清液中炎症因子IL-1β和IL-18水平较对照组显著增加。在直接共培养实验中发现IS+巨噬细胞培养基组与空白对照组和巨噬细胞培养基组相比,NLRP3、Pro-caspase 1、IL-1β、IL-18、ANP和脑钠肽蛋白表达显著上调(均P<0.05)。结论 IS可诱导NLRP3炎症小体活化,促进心肌细胞肥大蛋白表达。

• 单位
  佛山市三水区人民医院; 南方医科大学珠江医院; 南方医科大学深圳医院; 广州市妇女儿童医疗中心