粪便样本中志贺菌分离培养方法的优化

作者：王启发; 赫自强; 李银妹; 胡永峰; 金东^*

来源：疾病监测, 2021, 36(04): 350-354.

• 志贺菌
• ipaH基因
• 荧光定量PCR
• 分离培养

目的优化从腹泻患者粪便标本中分离培养志贺菌的方法。方法使用EC肉汤和志贺菌增菌液对129份粪便样本进行增菌培养,采用普通PCR方法检测ipaH基因,使用木糖赖氨酸去氧胆酸钠琼脂(XLD)培养基、麦康凯琼脂(MAC)以及沙门志贺菌培养基(SS)等选择性培养基分离培养志贺菌。使用志贺菌参考菌株,进行模拟增菌培养,利用荧光定量PCR方法分析不同增菌液的增菌效果。结果利用志贺菌增菌液在厌氧条件下增菌后的样本,ipaH基因阳性率(55.81%vs. 38.76%,P<0.01)和菌株分离率(26.36%vs. 37.21%,P>0.05)均高于EC肉汤。除了XLD培养基,使用MAC以及SS等选择性培养基,能够提高菌株分离率。福氏志贺菌在厌氧条件下增菌,能提高菌的含量(Ct值降低),但对宋内志贺菌的影响不明显。结论对腹泻患者粪便样本进行选择性增菌,结合分子生物学方法,使用2～3种不同选择性培养基进行分离培养,可能是提高志贺菌分离率的有效方法。

• 单位
  山西医科大学; 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所; 传染病预防控制国家重点实验室