光诱导RNAi系统的构建及优化

作者：王建华; 王雪; 杜增民; 赵玉政; 杨弋

来源：华东理工大学学报, 2015, 41(01): 28-33.

DOI：10.3969/j.issn.1006-3080.2015.01.005

• RNAi
• 光诱导基因表达系统
• shRNAmir
• 萤火虫荧光素酶

利用光诱导基因表达系统,构建光诱导RNAi系统,并对系统转染比例、转录因子的表达量和shRNAmir表达载体的核心启动子进行优化。通过构建不同启动子的光敏转录因子GAVPO表达载体和不同核心启动子的shRNAmir表达载体,分析它们对报告基因的干扰效果的影响。结果表明,GAVPO的表达量对报告基因沉默效果和shRNAmir的背景表达水平至关重要。低表达量的GAVPO能够实现对报告基因的微调控,报告基因的表达量下降到约60%;而高表达量的GAVPO能够高效抑制报告基因表达,报告基因的表达量下降到34%。

• 单位
  生物反应器工程国家重点实验室; 华东理工大学