菝葜RAPD扩增条件优化

作者:仇萍; 刘春林; 盛孝邦; 黄宇明; 张光贤
来源:中草药, 2010, (11): 1898-1901.

摘要

目的研究菝葜的RAPD-PCR扩增体系最适宜的条件。方法采用CTAB提取方法,从菝葜的嫩叶中提取总基因组DNA,以此为模板,优化菝葜RAPD-PCR的反应条件。结果 最适宜的PCR扩增体系为:反应体积30μL,内含0.20μmol/L引物、200μmol/L dNTP4、0 ng模板DNA、2 UTaqDNA聚合酶、2μmol/L Mg2+。结论通过扩增条件优化实验,建立了重复性好、稳定性高的药用植物菝葜RAPD-PCR扩增体系最适宜的条件,筛选出条带清晰多态性好的14条随机引物,共扩增得到144条电泳带,其中有多态性带62条,检测到了62个多态性位点,多态率为43%。