摘要
目的 观察供肝转染 IL- 10后基因表达情况。方法 应用改良“二袖套法”行 Lewis到 BN大鼠肝移植11例,然后分为对照组3例; 空载体转染组4例,术中供肝冷保存期门静脉注射 Lipofectamine 2000 pCR3.1 空载体质粒复合物,保存45 min后行肝移植; 重组 IL- 10(rIL- 10)转染组 4 例,术中供肝冷保存期门静脉注射 Lipo fectamine 2000 pCR3.1 rIL- 10复合物,保存45 min后行肝移植。术后第 6 天处死全部大鼠,取血清检测 IL-- 10 水平,另取肝组织行免疫组化染色和RT PCR检测肝细胞 IL -10 表达水平。结果 rIL- 10 转染组血清 IL -10 水平明显升高,肝上下腔静脉 IL 10 水平可达( 639. 27±67. 11 ) pg/ml,是肝下下腔静脉 IL 10 水平的近 1. 4 倍(P=0.024); 免疫组化染色结果示肝细胞胞桨呈棕黄色或深棕色,而其他两组肝细胞着色轻微或不明显。肝组织RT -PCR显示,IL- 10 mRNA的表达在 rIL -10转染组明显处于高水平(P=0.000)。结论 脂质体介导,体外冷保存期经门静脉途径进行供肝转染 IL- 10,可以使 IL -10在肝脏获得较高水平的表达。
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单位首都医科大学附属北京友谊医院