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摘要
目的：构建 ｓｕｒｖｉｖｉｎ基因特异性 ｓｈＲＮＡ慢病毒干扰载体，转染膀胱癌 ＥＪ细胞，研究 ｓｕｒｖｉｖｉｎ基因在膀胱癌细胞株中的表达抑制情况，观察 ｓｕｒｖｉｖｉｎｓｈＲＮＡ慢病毒载体对 ＥＪ细胞凋亡的影响．方法：以 ｓｕｒｖｉｖｉｎ基因为靶标设计 ｓｈＲＮＡ干扰序列，克隆至 ｐＳＩＨ１Ｈ１ｃｏｐＧＦＰ慢病毒载体．干扰载体鉴定正确后转染膀胱癌细胞株 ＥＪ细胞，荧光显微镜下观察 ＧＦＰ表达情况，实时荧光定量 ＰＣＲ检测 ｓｕｒｖｉｖｉｎ基因 ｍＲＮＡ含量变化，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ法检测 ｓｕｒｖｉｖｉｎ蛋白表达，ＡｎｎｅｘｉｎＶＦＩＴＣ／ＰＩ双染法检测 ＥＪ细胞凋亡情况．结...
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