实时荧光定量PCR筛选牛源整联蛋白αv基因的siRNA片段

作者：张**; 独军政; 常惠芸; 薛霜; 骆继怀

来源：动物医学进展, 2011, (03): 56-60.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2011.03.015

• 实时荧光定量PCR
• 整联蛋白
• RNA干扰
• SYBR GreenⅠ real-time PCR
• integrin
• RNA interference
• SYBR greenⅠ

设计并合成三条针对牛口蹄疫病毒(FMDV)整联蛋白受体αv亚基基因的特异性干扰小RNA(SiRNA)片段,将其转染至本身表达整联蛋白受体αv亚基基因的MDBK细胞。分别在转染后36 h和48 h收集细胞,提取细胞总RNA并反转录为cDNA。应用SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR的方法检测3个siRNA片段的干扰效果,筛选出对整联蛋白αv基因具有高效干扰效果的小RNA片段。为建立抗口蹄疫病毒牛新品种培育的RNA干扰转基因技术平台奠定了基础。

• 单位
  家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 农业部; 中国农业科学院兰州兽医研究所