果树基因组DNA的提取和PCR扩增测序方法

作者：苑克俊; 刘庆忠; 艾呈祥; 王绛辉

来源：分子植物育种, 2007, S1: 173-176.

• 苹果
• 基因组DNA
• DNA提取
• PCR产物
• DNA测序

为避免多年生果树组织中的多糖和酚类物质影响基因组DNA的提取质量,在CTAB提取缓冲液中加入2%PVP-40和2%β-巯基乙醇,以改进的CTAB提取方法从苹果嫩叶中提取基因组DNA。所得DNA样品D260nm/D280nm比值为1.98～2.05,纯度高。当用DNA样品和设计的特异引物进行PCR扩增时,其PCR产物只出现一条清晰电泳谱带,质量满足测序要求,采用DNA纯化试剂盒纯化后可直接用于测序。该方法已成功用于"国光"和"金冠"苹果的基因组DNA测序,是一个操作简便、快捷和高效的方法,非常适用于果树基因组DNA的提取和测序。

• 单位
  山东省果树研究所; 山东省农业科学院