孕酮诱导的蜕膜蛋白Depp在哺乳细胞株的转染表达与定位

陈应炉; 朱恒锐; 杨军; 耿慧武; 刘君; 刘晓颖; 范礼斌

doi:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2011.02.007

摘要

目的将孕酮诱导的蜕膜蛋白Depp基因构建到pC-DGFP表达载体中,分析其在哺乳细胞株中的表达和定位情况。方法用PCR方法扩增Depp全长序列,插入真核表达载体pCDGFP中,将构建好的质粒转染至COS7细胞,在荧光显微镜下观察其细胞定位;转染至HEK 293T细胞,提取总蛋白,利用GFP抗体进行Western blot检测。结果荧光显微镜观察表明,Depp蛋白主要分布在COS7细胞的胞质内,在细胞核周呈斑块状分布,在细胞核未见到明显表达,在HEK293T细胞中能有效表达。结论成功构建pCDGFP-Depp表达载体并确定Depp蛋白在哺乳细胞株中能有效表达。

单位
复旦大学; 安徽医科大学; 遗传工程国家重点实验室

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更新时间：2020-06-16 22:14

孕酮诱导的蜕膜蛋白Depp在哺乳细胞株的转染表达与定位

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