核心钟基因Bmal1通过JNK/caspase-3信号通路抑制缺血再灌注损伤PC12细胞的炎症及凋亡

作者：曾富康; 张宇星; 周德生; 陈瑶; 刘利娟; 李中^*

来源：中国病理生理杂志, 2022, 38(11): 1972-1980.

• 脑缺血再灌注损伤
• Bmal1基因
• 炎症
• 细胞凋亡
• JNK/caspase-3信号通路

目的：探讨核心钟基因Bmal1(brain and muscle Arnt-like 1)对脑缺血再灌注损伤后细胞炎症反应及凋亡的影响。方法：通过慢病毒转染建立Bmal1基因沉默（si-Bmal1）及阴性对照（si-NC）的稳定大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞株，将细胞分为空白（blank）组、氧糖剥夺/复氧（OGD/R）组、OGD/R+si-NC组及OGD/R+si-Bmal1组。通过OGD/R诱导建立脑缺血再灌注损伤体外模型，CCK-8法检测沉默Bmal1基因对细胞活力及OGD/R后细胞活力的影响；Western blot法检测Bmal1、磷酸化c-Jun氨基末端激酶（p-JNK）及cleaved caspase-3蛋白水平；RT-qPCR法检测Bmal1、JNK及caspase-3的mRNA表达水平；ELISA法检测细胞上清液中白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平；流式细胞术及TUNEL染色法检测各组细胞凋亡率；免疫荧光检测JNK核内表达情况。结果：沉默Bmal1基因使PC12细胞活力及OGD/R后PC12细胞活力均显著下降（P<0.05或P<0.01）。沉默Bmal1基因可进一步促进OGD/R后JNK/caspase-3通路相关分子的mRNA及蛋白表达（P<0.05或P<0.01），增加细胞上清液中炎症因子IL-6和TNF-α水平及细胞凋亡率（P<0.05或P<0.01），促进JNK核内表达。结论：核心钟基因Bmal1抑制缺血再灌注损伤PC12细胞的炎症反应及凋亡，其机制可能与JNK/caspase-3信号通路有关。

• 单位
  湖南中医药大学第一附属医院; 湖南中医药大学