环状RNA-UBXN7促进肝癌细胞增殖和迁移并抑制其凋亡

作者：姚建宁; 张学秀; 张延祯; 李艳乐; 王春峰; 张连峰^*

来源：中华肝脏病杂志, 2020, 28(05).

• 肝细胞癌
• 增殖
• 迁移
• 环状RNA-UBXN7

目的探讨环状RNA-UBXN7(circUBXN7)对肝癌细胞增殖、迁移以及凋亡的影响, 并初步探讨其中的分子机制。方法采用qRT-PCR检测circUBXN7在肝癌组织和细胞中的表达水平, 并分析circUBXN7与患者临床病理因素如年龄、性别、肿瘤体积、病理分型、分期、淋巴结转移之间的相关性。构建携带circUBXN7全长序列的慢病毒(Lenti-circUBXN7)和携带circUBXN7 shRNA的慢病毒(Lenti-circUBXN7-shRNA)分别转染肝癌细胞株(HepG2和HUH-7)。CCK-8实验检测circUBXN7表达上调或下调后对HepG2和HUH-7细胞的增殖能力的影响。Annexin V/PI实验检测circUBXN7表达上调或下调后HepG2和HUH-7细胞的凋亡变化。JC-1法检测circUBXN7表达上调或下调后HepG2和HUH-7细胞线粒体势能的变化。Transwell检测circUBXN7表达上调或下调后HepG2和HUH-7细胞迁移能力变化。蛋白质印迹法检测细胞上皮间质化标志蛋白TWIST、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-cadherin、Vimentin的表达变化。circUBXN7表达水平与临床病理因素采用χ2检验, 两组比较采用t检验, 三组及以上比较采用单因素方差分析且组间比较采用LSD法。结果 circUBXN7在肝癌组织中表达显著高于癌旁组织, 且其表达水平与肿瘤体积、分期和淋巴结转移显著正相关(P < 0.05)。Lenti-circUBXN7可以上调HepG2和HUH-7细胞内circUBXN7表达并促进细胞增殖;Lenti-circUBXN7-shRNA可以下调circUBXN7表达并诱导细胞凋亡。Lenti-circUBXN7-shRNA可以导致细胞线粒体膜势能降低。Lenti-circUBXN7可以促进细胞迁移, 而Lenti-circUBXN7-shRNA可以抑制细胞迁移。Lenti-circUBXN7可以诱导Twist、N-cadherin、Vimentin蛋白表达增高, 并降低E-cadherin蛋白表达;而Lenti-circUBXN7-shRNA对各蛋白表达水平的影响则相反。Starbase V2.0软件显示miR-203a与circUBXN7存在潜在结合位点, 并且在HepG2和HUH-7细胞中miR-203a与circUBXN7表达水平呈负相关。结论 circUBXN7在肝癌发生发展中发挥重要促癌作用, 有望成为肝癌治疗的潜在靶点。

• 单位
  第一附属医院消化内科; 郑州大学