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摘要
目的研究多能性因子Nanog对HepG2细胞周期相关蛋白表达的影响,进而探索其对HepG2细胞增殖能力的影响。方法本研究通过基因编辑工具TALENs介导Nanog突变而下调其表达,T7E1内切核酸酶和基因测序分析Nanog突变率,Western blot检测Nanog蛋白表达水平,RT-PCR检测Nanog mRNA表达水平,实时细胞活性检测系统检测野生型HepG2细胞和Nanog突变的单克隆HepG2细胞的增殖能力。结果 TALENs成功介导Nanog基因突变,两次转染Nanog-TALENs质粒后,T7E1酶切分析混合细胞的打靶效率近40%。突变的单克隆HepG2细胞Nanog mRNA表...
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单位十堰市太和医院; 武汉大学; 武汉大学中南医院
