摘要

背景:前期研究发现,黄精多糖通过Wnt/β-catenin信号通路促进骨髓间充质干细胞成骨分化,但是其促进骨髓间充质干细胞成骨分化的作用及分子机制尚不明确。目的:探讨黄精多糖LRP5激活Wnt信号通路促进小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的研究。方法:培养C57BL/6小鼠骨髓骨髓间充干细胞,构建LRP5干扰载体,转染C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞,转染后在荧光倒置显微镜下计算细胞荧光转染效率及Western Blot检测LRP5蛋白的表达。碱性磷酸酶、茜素红染色和Western Blot分析转染LRP5-siR NA病毒后小鼠骨髓间充质干细胞成骨能力的改变;RT-PCR及双荧光素酶检测黄精多糖对沉默LRP5的小鼠骨髓间充干细胞的成骨分化作用。结果与结论:(1)与对照组相比,LRP5转染组细胞显著降低细胞的矿化能力(P<0.05),明显降低Osterix、Runx2基因及LRP5蛋白的表达(P<0.05);(2)黄精多糖能促进转染LRP5-siR NA病毒的小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,能显著上调β-catenin及Osterix基因的表达(P<0.05),促使含有TCF结合位点的荧光素酶报告基因(TOPFlash)的高表达(P<0.05);(3)结果说明,LRP5在小鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化过程中有重要作用。黄精多糖不依赖于LRP5激活Wnt/β-catenin信号通路促进小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化。