重组人白细胞介素-10在大肠杆菌中的表达及生物学活性分析

作者：井申荣; 邹全明; 罗萍; 洪愉; 朱永红

来源：中国生物制品学杂志, 2005, (04): 288-290.

DOI：10.13200/j.cjb.2005.04.20.jingshr.005

• 重组人白细胞介素-10
• 可溶性蛋白
• 包涵体
• 生物学活性

目的在大肠杆菌中表达重组人白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10),并检测其生物学活性。方法将IL-10基因重组到质粒pET11c中,转化BL21(DE),提取质粒,经酶切鉴定和测序分析;在25℃用低浓度的IPTG诱导表达,对包涵体IL-10稀释复性;经ELISA检测其含量,MC/9细胞增殖法检测其生物学活性。结果工程菌IL-10/pET11c/BL21诱导表达的目的蛋白以可溶性和包涵体两种形式存在,Westernblot鉴定证实为IL-10蛋白,两种形式的IL-10均具有一定的生物学活性。结论已成功地在大肠杆菌中表达了IL-10,为进一步纯化和制备IL-10的基因工程药物打下了基础。

• 单位
  第三军医大学