miR-194-5p在微流控芯片筛选的肺癌间质表型亚系的作用

作者：王洁; 于敏; 方瑾^*

来源：解剖科学进展, 2019, 25(04): 442-449.

DOI：10.16695/j.cnki.1006-2947.2019.04.024

• 上皮间质转化
• 肺癌间质表型亚系
• 生物信息学
• miR-194
• 微流控芯片

目的分析肺癌间质表型亚系A3细胞中上皮间质转化(EMT)相关的miR-194-5p鉴定、分析及其靶基因功能富集的生物学过程和信号通路。方法使用微流控芯片筛选母系肺癌A549细胞获得间质表型亚系A3细胞,利用miRCURYTM芯片筛选差异性表达的miRNA。利用MTT、Transwell实验检测miR-194-5p对亚系细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。应用Miranda、MiRBase、TargetScan数据库和DAVID在线软件对miR-194-5p进行靶基因预测及相关信号通路、生物学功能富集分析。结果成功筛选获得具有间质表型亚系A3细胞,与母系A549细胞相比,在A3亚系中miR-194-5p的表达水平显著下调,转染miR-194-5p mimics后细胞迁移和侵袭能力发生显著降低但增殖未受影响;转染miR-194-5p inhibitor后细胞的迁移和侵袭能力增强。miR-194-5p的48个靶基因主要在蛋白质结合等生物学过程中起作用,信号通路显著富集于TGF-β等EMT相关信号转导通路。结论从微流控芯片获得的间质表型细胞亚系成功筛选EMT相关miRNA,其中miR-194-5p抑制肺癌EMT进程,是潜在的治疗靶点。

• 单位
  中国医科大学; 生命科学学院