摘要
目的观察TRIM29基因在胶质瘤组织中的表达及其与临床病理特征的关系,探讨其对胶质母细胞瘤细胞U-87 MG增殖与迁移的影响以及可能的作用机制。方法采用免疫组织化学法检测56例胶质瘤组织和正常脑组织中TRIM29蛋白的表达,分析胶质瘤组织中TRIM29蛋白表达与临床病理特征的关系。Western blot检测胶质母细胞瘤组织、癌旁组织及正常组织中TRIM29蛋白的表达,同时检测其在不同胶质瘤细胞株(A172、LN-229、U-87 MG、U-118 MG)中的表达。利用RNA干扰技术处理高表达TRIM29的胶质母细胞瘤细胞U-87 MG,并分为空白对照组、sh Scramble组(阴性对照组)及sh TRIM29组(实验组)。采用MTT实验、克隆形成实验和Transwell实验分别检测敲低TRIM29对胶质母细胞瘤细胞U-87 MG增殖和迁移能力的影响。进一步通过裸鼠成瘤实验检测敲低TRIM29在体内对胶质母细胞瘤细胞U-87 MG增殖的影响。采用Western blot检测TRIM29敲低后AKT通路蛋白的变化。结果 TRIM29在胶质瘤组织中较正常脑组织表达增加,且与患者WHO分级呈正相关(r=0.535,P<0.05)。Western blot检测结果显示,与正常脑组织和癌旁组织相比,胶质母细胞瘤组织中TRIM29蛋白的表达明显上调(P<0.05)。TRIM29在胶质瘤细胞A172、LN-229、U-87 MG、U-118 MG中蛋白的表达分别为(0.27±0.02)、(0.69±0.04)、(1.24±0.08)、(0.82±0.06)。RNA干扰处理后,sh TRIM29组U-87 MG细胞TRIM29蛋白的表达量为(0.27±0.04),明显低于空白对照组和sh Scramble组[(1.64±0.05)、(1.51±0.05),P<0.05]。同时,与空白对照组和sh Scramble组相比,sh TRIM29组U-87 MG细胞的增殖、迁移能力明显下降(P<0.05)。在胶质母细胞瘤细胞U-87 MG中敲低TRIM29后,p-AKT蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论 TRIM29在胶质瘤中高表达,与肿瘤的恶性程度呈正相关,可能通过AKT信号通路促进细胞的增殖及迁移。
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单位第三军医大学; 重庆医科大学; 中国人民解放军第二炮兵总医院; 中国人民解放军陆军军医大学