调控毛囊生长CCDC72基因启动子克隆及萤光素酶报告基因载体的构建

作者：孙丽华; 宋志强; 郝飞

来源：实用医院临床杂志, 2009, 6(02): 7-9.

• 毛囊
• CCDC72基因
• 启动子
• pGL3-Basic载体
• 基因序列分析
• 基因克隆

目的对新发现的调控毛囊生长相关的CCDC72基因启动子序列进行分析,克隆并构建不同长度启动子萤光素酶报告基因载体。方法运用在线软件Cister对CCDC72基因5’端2000bp进行启动子特征分析;以人毛乳头细胞基因组DNA为模板进行PCR扩增目并进行测序鉴定,再以扩增产物为模板PCR得到不同长度的启动子片段,并测序,将获得启动子片段插入pGL3-Basic载体。结果序列分析发现起始密码子ATG上游的-1~-200bp及-600~-1000bp的区域内存在多个顺式作用元件,成功获得1924bp扩增片段,并构建了4个不同长度的CCDC72启动子报告基因载体。结论上述载体的成功构建及序列分析为进一步研究CCDC72基因的启动子活性及基因表达调控奠定了基础。

• 单位
  第三军医大学西南医院