复氧前给予不同浓度乳化异氟醚的大鼠缺氧/复氧心肌细胞损伤情况观察

作者：王佳琪; 徐鹏; 陈伟; 李晓娟; 王海英^*; 喻田

来源：山东医药, 2020, 60(09): 36-39.

• 乳化异氟醚
• 心肌细胞
• 缺氧/复氧损伤
• NF-E2相关因子2/抗氧化反应原件通路
• 心肌保护

目的观察复氧前给予不同浓度乳化异氟醚(EI)的大鼠缺氧/复氧心肌细胞损伤情况。方法手术分离雄性SD大鼠心肌细胞并培养,将心肌细胞随机分为FAT组和不同浓度EI处理组(EI1组、EI2组、EI3组),采用混合气体培养法制备缺氧/复氧心肌细胞,其中FAT组复氧前加入脂肪乳(FAT)进行处理,EI1组、EI2组、EI3组复氧前分别加入0. 84、1. 68、2. 52 mmol/L EI进行处理。收集各组心肌细胞,进行细胞线粒体损伤评分(Flameng评分),测定细胞内游离Ca2+荧光强度,观察细胞内NF-E2相关因子2(Nrf2)蛋白核转位荧光强度,采用RT-PCR法和Western blotting法分别检测各组细胞中Nrf2、血红素加氧酶-1(HO-1)、超氧化物歧化酶1(SOD1)、醌氧化还原酶1(NQO1) mRNA和蛋白。结果不同浓度EI处理组细胞线粒体Flameng评分和细胞内游离Ca2+荧光强度均低于FAT组,且EI2组最低。EI1组、EI2组、EI3组、FAT组细胞内Nrf2蛋白核转位荧光强度分别为152. 71±13. 36、181. 95±10. 59、156. 39±11. 20、135. 25±19. 73,其中EI2组细胞内Nrf2核转位荧光强度与EI1组、EI3组、FAT组相比,P均<0. 05。不同浓度EI处理组Nrf2、HO-1、SOD1、NQO1 mRNA和蛋白相对表达量均高于FAT组,且EI2组最高。结论复氧前给予不同浓度EI处理对大鼠缺氧/复氧心肌细胞均可起到保护作用,1. 68 mmol/L的EI保护作用最优; EI可能是通过激活Nrf2/ARE通路发挥保护作用。

• 单位
  遵义医科大学; 湘潭市中心医院