摘要
基于硫代糖苷类化合物对糖苷酶的水解抗性,设计并合成了以对硝基苯酚为紫外吸收基团的二糖底物分子4-硝基苯基N,N’-二乙酰基-4-硫基-β-壳二糖苷(pNP-TCB),并分别研究了两个糖苷水解酶第18家族(GH18)几丁质酶和第20家族(GH20)β-N-乙酰己糖胺酶对p NP-TCB的降解响应.结果显示底物pNP-TCB几乎不被β-N-乙酰己糖胺酶降解,却能够被几丁质酶降解并释放出对硝基苯酚,该分子可在405nm处通过酶标仪检出.表明底物p NP-TCB具有良好的特异性,从而实现细胞水平GH18几丁质酶的性质研究且不受己糖胺酶的干扰,为GH18几丁质酶和GH20β-N-乙酰己糖胺酶的筛选分离提供良好的检测手段.
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